A. 면역검사를 위한 실험실 준비 및 질관리(의사, 병리사, 의무기록사)
1. 검사실 운영: 기기 점검, 검사법 평가, 시약 평가, 신규검사 도입, 검사실 안전관리, 위험물질 관리, 폐기물 관리, 재활용 관리, 검사보고 방식 운영 및 관리, 검사 결과 자료백업, 표본 보관, 블록 보관, 검사 결과 보관, 환자의 자료 유출 방지, 시약 및 소모품 재고관리, 검사실 시설 관리
2. 정도관리: 외부정도관리 참여, 내부정도관리 실시, 외부의뢰 검사 정도관리, 정도관리인증서 확인 및 대응, 내부정도관리 확인 및 대응
3. 수기 및 지침서: 정도관리지침서 작성 및 검토, 검사지침서 작성 및 검토, 표준 검사수기 확인 및 추가작성
4. 교육: 병리전문의의 외부 연수교육 및 내부 교육 참여, 병리사 외부 및 내부 교육 참여, 병리전문의의 내부 임상 집담회 참여, 임상-병리집담회 (CPC) 참여, 임상전문의 교육, 전공의 및 파견 전공의 교육, 간호사 교육
5. 진단향상 관리: 진단향상을 위한 병리전문의의 학회, 집담회, 표준화 프로그램 참여.최신진단명, 진단방법, 진단기준, 진단양식 습득
6. 질향상 관리: 질향상 계획 수립, 실시 및 질향상 프로그램 참여, 조직표본위원회 운영, 병리전문의 내부 및 외부위원회 참여, 병리사 내부 및 외부위원회 참여
B. 면역조직(세포)화학검사전 준비 (의사, 병리사)
< 면역조직화학검사를 위한 준비 및 확인 >
1. 검체 접수 및 관리
1) 환자의 확인을 위한 검체 라벨이나 의뢰지에는 환자 성명, 등록 번호, 나이, 의뢰과 등이 표기 되어 있어야 한다.
2) 검체는 10% 중성 Formalin에 고정한 조직을 사용한다.
3) Oven에서 조직 부착시 oven 온도를 적절하게 유지한다.
2. 각종 시약 및 KIT 관리
1) 일차항체
가) 입고 후 반드시 냉장 보관한다.{보관온도(2~8℃)}(수송상의 문제도 점검한다.)
나) 반드시 antibody 관리 목록에 입고일과 제조사, clone명, staining pattern, pretreatment, control tissue, 보관방법, 유효기간 등을 기록한다.
다) 보관 방법이 냉동보관인 Antibody는 antibody의 사용 희석배수를 감안하여 aliquot하여 보관한다. (단기 사용용 antibody 분주 vial만 냉장 보관하며 나머지 동량 분주한vial은 장기보관을 위해 -20℃내지 -75℃ deep freezer에 보관한다.)
라) 희석하여 놓은 antibody의 경우 외부 bottle에 희석날짜를 기록하고 antibody 역가소실전에 소모될 수 있도록 한다.(유효일 3개월로 한다.)
마) Lot 번호가 다른 antibody의 경우 positive control block으로 검사 시행 후 유효성이인정되는 경우 환자 검체의 실제 검사에 적용한다.
바) 시약의 유효기간이 지난 경우 positive control을 사용하여 시약의 유효성을 확인한다.positive control 염색의 문제가 발생하면 시약을 폐기한다.
2) KIT
가) 입고 후 반드시 냉장 보관한다.
나) kit 수령시 유효일을 확인하고 사용시에는 유효일이 적게 남은 kit부터 사용한다.
다) kit의 선택은 antibody의 특성(생산 species, 희석배수, paraffin block 사용여부block 사 용여부, monoclonal or polyclonal 등)을 고려하여 선택한다
3) Buffer
가) TBS bufferbuffer는 냉장 보관한다
나) Wash buffer10×Wash buffer를 1:10으로 희석하여 Wash buffer로 사용하며 buffer는 냉장 보관한다.
4) 기타 시약류항상 보관온도 및 유효기간을 잘 확인하며 사용 전 확인이 필요하다.
3. 시설 및 장비, 기구관리
1) 시설 및 장비
가) 공간적으로 분리되어 있어야 한다.
(1) 작업대가 분리되어 있어야 한다.
(2) 별도의 배기 시설인 Fume hood가 설치되어 있어야 한다.
(3) 폐쇄형 자동화 장비인 Bond Max를 2대 보유하고 있다.
나) 검사에 적정한 실내 온도와 습도를 유지해야 한다.(온·습도계 구비 및 실내 온·습도점검)
다) 검체 및 시약 보관 장비(냉장고, 냉동고, -75℃ deep freezer)는 매일 온도를 측정하고, 음식물 반입을 금한다.
라) 각각의 장비는 가동 전 이상 유무를 확인라고 장비 점검표를 작성 유지, 관리한다.
2) 기구사용한 기구는 잘 세척하여 건조하게 보관하고 이물질이 들어가지 않도록 보관한다.
4. 슬라이드
1) 당일 나온 slide는 당일 review한다.
2) 면역 염색 박절 시 해당 block의 병리번호를, 면역 염색 시행 전과 후에는 해당 slide의 병리번호, 시행한 antibody명 등을 잘 확인하여 검체의 확인 및 정확도를 유지한다.
3) 면역병리검사 완료 후 병리 의사에 의한 염색 질평가를 매번 시행한다. 면역 병리 염색의 질평가 기준에는 PS(Poor Staining), OS(Over Staining), LS(Local Staining), BG(Background), CO(Contamination), IT(InadequateTrimming),PM(Poor Mounting), ML(Mislabelling) 등이 있다.
4) 염색 제작 지연 시 이유 평가를 시행한다.(당일 4시 이전 면역병리검사 의뢰시 익일표본이 제작되고, 당일 4시 이후 의뢰 시 제 3일째 표본이 제작된다 : 주말, 휴일 제외) 면역 병리 염색의 제작 지연 이유는 처방오류1(병리번호), 처방오류2(염색명), 시행오류1(병리번호), 시행오류2(염색명) 등이 있다.
5. Control
1) 각 항체에 대한 positive control block을 기록하여 놓는다. (신규 검사 시, 염색에 문제 발생시 양성 대조 조직을 함께 염색하여 확인한다.)
2) 매번 염색 시 양성 대조 염색을 함께 시행한다.(검체 내에 internal control이 있는 경우 대체할 수 있다.)
3) 면역 염색을 같은 조건 하에 시행할 경우 한번의 음성 대조(일차 항체 희석액) 염색을시행한다.
