1. 정액 액화 (Semen liquefaction) 32~34℃ 항온판(slide warmer) 위에서 15분~30분 동안 정액 액화를 시행한다.
2. 정액 검사정액량(Volume), 정자농도(concentration), 운동성(motility), 직진운동성(progressivemotility), 활동성(sperm activity) 등을 측정하며 그 외 점도(viscosity), 응집도(agglutination), 잔해물(debris), 백혈구(WBC), 적혈구(RBC)가 관찰되는 경우 추가 기재한다.
3. 정액량(Volume), 점도(viscosity), 잔해물(debris)측정피펫에이드(pipet aid)를 이용하여 정액량(Volume)을 확인 한 후 ml 단위로 표기하고, 점도는 정도에 따라 viscosity(0, 1+, 2+, 3+), debris가 관찰되면 semen 전체 volume 대비잔해물(debris) 정도는 양에 따라 debris(0, 1+, 2+, 3+)를 표기한다.
4. 응집도(agglutination), 활동성(sperm activity) 측정계수판(markler chamber)를 이용하여 200배율의 위상차 현미경으로 관찰 시 정자 응집도(agglutination)는 정도에 따라 agglutination(0, 1+, 2+, 3+)를 표기하고, 활동성(sperm activity)은 움직임 속도와 방향에 따라 activity(R, M, S, sh)로 표기한다.
5. 정자농도(concentration), 운동성(motility), 직진운동성(progressive motility) 측정
6. 계수판(markler chamber)에서 정자 관찰 가능 시, 정자농도(concentration), 운동성(motility) 등을 측정하여 결과지에 기록한다. 직진운동성(progressive motility)는 운동성정자 중 제자리 운동을 하는 정자를 제외한, 직진성 운동을 하는 장자 수를 측정하여 %로 표기한다.
7. 계수판(markler chamber)에서 sperm 관찰 불가능 시, 심화 검사를 위한 pellet 생성을위해 PBS media로 세척 후300g 속도로 5분 동안 원심분리 후 상층 액을 제거하고pellet을 잘 풀어준 후 slide glass에 10ul 단위로 검사하여 운동성 정자(progressivesperm), 제자리 운동 정자(shaking sperm), 비운동성 정자(immotile sperm) 개수를 결과지에 기록한다.