1. 포괄적 시술 전 행위 (요약) 1) 의사는 인사관리, 안전관리, 시설관리, 시약 및 물품관리 등 검사실을 운영한다. 2) 의사는 검사방법, 정도관리 방법을 결정하고, 해당 검사실의 참고치를 입증과정을 통해 설정한다. 3) 검사의 원리, 임상적의의, 검체조건, 시약의 준비사항, 캘리브레이션, 정도관리법, 검사방법, 계산법, 참고치, 해석 등이 기술된 검사지침서를 작성한다. 4) 검사의 지속적 질향상을 위해 내부 및 외부정도관리를 실시하고 결과를 검토하여 검사수행에 반영하며, 검사지침서를 주기적으로 최소한 1년에 1회 재검토한다. 2. 정액 채취실 (Semen-collection room) 1) 정액 채취실 조건정액 채취는 그 목적에 합당한 전용실로 방음 시설이 완비된 원내 지정장소에서 이루어져야 하며, 정액은 온도 변화에 민감하기 때문에 채취한 정액이 외부 환경에 노출되는것을 제한하고 정액 채취와 검사 실시 사이의 시간을 제어하기 위해 검사실과 인접하게위치 해야 한다. 2) 정액 채취실 환경정액 채취실은 기본 25~28℃를 유지하고, 개인 차에 따른 선호 온도를 지정할 수 있도록온도 조절이 가능하도록 해야 한다. 개인 위생을 위하여 수전과 손 소독제 및 세정제를구비하며, 일회용 커버를 사용함으로써 감염에 대한 안전성을 확보해야 한다. 이 외에 정액 채취 전반에 대한 문의 및 응급상황에 대비하여 정액 채취실 관리자와 연결 가능한직통 인터폰을 설치해야 한다. 3. 개별 시술 전 행위 1) 검체가 검사에 부적절하다고 판단되는 검체는 재채취를 요구하거나, 재채취가 어려운경우 이를 별도로 기록해 둔 후 최종 검사결과 보고시 이러한 특성을 표시한다. 4. 감염환자 정액 채취 시 유의 사항일반 환자 정액 채취와 다르게 감염환자의 경우, 모든 의료진과 연구원에게 정액 채취전 감염정보를 상세히 알려야 하며 처리에 유의하도록 공지하여야 한다. 정액 채취 후정액 채취실은 감염 종류에 맞는 소독제 등을 이용하여 소독과 청결 작업을 하고, 감염종류에 따라 일정 시간 동안 사용을 중지한다. 5. 역행성사정 정액 채취 시 유의 사항역행성사정 정액을 채취 할 경우는 채취 방법에 대해 진료의를 통해 자세히 설명을 듣고올바른 방법으로 수행하여 채취 되어야 하며, 정액과 함께 분비되는 소변의 낮은 산도에 의한 영향이 최소화 하도록 정액 세척 시 사용하는 media를 제출 후 바로 주입하는것이 좋다.

1. 감염 정액 처리 1- 1. 정액 액화 (Semen liquefaction) 32~34℃ 항온판(slide warmer) 위에서 15분~30분 동안 정액 액화를 시행한다. 1- 2. 정액 검사 (비 감염 정액처리 시 검사 방법과 동일) 정액량(Volume), 정자농도(concentration), 운동성(motility), 직진운동성(progressivemotility), 활동성(sperm activity) 등을 측정하며 그 외 점도(viscosity), 응집도(agglutination), 잔해물(debris), 백혈구(WBC), 적혈구(RBC)가 관찰되는 경우 추가 기재한다. 1- 3. 밀도 구배 원심 분리(density gradient separation) 처리환자정보가 입력된 15ml 원심관 튜브(conical tube)에 준비된 45%(v/v) density-gradient medium 2ml과 90% (v/v) density-gradient medium 2ml를 넣어 층을 형성한후 그 위에 전체 정액을 올려, 300g 속도로 15분 동안 원심분리를 하여 정액 내 잔해물과 백혈구 등을 제거하고 아래쪽에 모인 정자를 회수 한다. 1- 4. 정자 세척 (Sperm washing) 밀도 구배 원심 분리 처리 후 회수 된 정자는 15ml 원심관 튜브(conical tube)에 넣고 준비된 ham’s media로 세척 후 300g 속도로 5분 동안 원심 분리하여 pellet을 생성한다. 1- 5. 정자 선별 부유(swim-up separation) 처리정자 세척을 완료한 후 상층 액을 완전히 제거하고 남은 pellet 위에 약 0.5ml의 Ham'sF-10 medium을 천천히 넣어 층을 형성한 후 15ml 원심관 튜브(conical tube)를 45°로기울여 37℃, 5% 이산화탄소 농도의 배양기(incubator)에서 30분~60분 동안 운동성 정자의 부유가 일어나도록 반응 시킨다. 1- 6. 정자 획득pellet 위로 부유한 운동성 있는 정자만을 획득 한 후 환자정보가 입력된 1.5ml 마이크로튜브(safe-lock tube)에 보관하며 이 과정에서 처리자 외 연구원 1인 이상의 확인을 원칙으로 한다. 1- 7. 처리 완료 정자 인계생식보조시술에 사용 할 준비가 끝난 정자는 지정된 배양기(incubator)에서 보관 후 시술 직전 환자정보와 부부 정보 일치 여부를 담당 간호사와 연구원 1인 이상이 확인한 후인계한다. 2. 역행성사정 정자 처리 2- 1. 정액 액화 (Semen liquefaction) 역행성사정 정액 처리 시, 정액과 함께 분비되는 소변의 낮은 산도에 의한 영향이 최소화 액화 시간 지체 없이 바로 검사와 처리를 개시한다. 또한 소변의 낮은 산도에 의한 영향이 최소화 하도록 Ham's F-10 medium을 검체와 동량으로 즉시 주입한다. 2- 2. 정액 검사 (일반 정액처리 시 검사 방법과 동일) 소변을 포함한 정액량(Volume), 정자농도(concentration), 운동성(motility), 직진운동성(progressive motility), 활동성(sperm activity) 등을 측정하며 그 외 점도(viscosity), 응집도(agglutination), 잔해물(debris), 백혈구(WBC), 적혈구(RBC)가 관찰되는 경우 추가 기재한다. 2- 3. 정액 세척 (Semen washing) 환자정보가 입력된 50ml 원심관 튜브(conical tube)에 검체와 동량으로 Ham's F-10medium을 미리 섞어 둔 검체를 넣고 잔해 물 제거 후 300g~500g 속도로 5분~10분 동안 원심분리 한다. 원심분리 후 상층 액을 제거한다. 2- 4. 밀도 구배 원심분리(density gradient separation) 처리환자정보가 입력된 15ml 원심관 튜브(conical tube)에 준비된 45%(v/v) density-gradient medium 2ml과 90% (v/v) density-gradient medium 2ml를 넣어 층을 형성한후 그 위에 정액 세척 후 획득한 pellet을 올려, 300g 속도로 15분 동안 원심분리를 하여정액 내 잔해 물과 백혈구 등을 제거하고 아래쪽에 모인 정자를 회수 한다. 밀도 구배 원심 분리 처리 후 회수 된 정자는 준비된 Ham's F-10 medium으로 세척 후 300g 속도로5분 동안 원심분리 한다. 세척 과정은 2번 시행한다. 2- 5. 정자 획득밀도 구배 원심분리 처리를 획득 한 정자는 환자정보가 입력된 1.5ml 마이크로 튜브(safe-lock tube)에 보관하며 이 과정에서 처리자 외 연구원 1인 이상의 확인을 원칙으로한다. 2- 6. 처리 완료 정자 인계생식보조시술에 사용 할 준비가 끝난 정자는 지정된 무균상자(incubator)에서 보관 후시술 직전 환자정보와 부부 정보 일치 여부를 담당 간호사와 연구원 1인 이상이 확인한후 인계한다.

1. 결과 입력디지털 기록(Digital recording)은 원내 OCS(EMR) system에 입력하며 문서 기록(paperrecording)은 생식보조시술 장부 기재 후 처리자 외 연구원 1인 이상의 검수를 원칙으로하며, 10년 보관 한다. 2. 지속적인 질향상을 위해 검사결과를 주기적으로 통계 분석한다.