1. 음낭을 중앙에서 절개하여 일측 고환을 노출시킨다.
2. 고환초막을 절개하여 고환, 부고환을 충분하게 노출시킨다.
3. 수술현미경을 진입하며 미세수술준비를 한다.
4. 수술현미경을 보면서 4-8배 확대시야에서 고환백막의 혈관부위를 피하면서 백막의적도면을 따라 길게 횡절개로 고환의 실질부위를 노출한다.
5. 노출된 고환조직을 15-25배 수술현미경을 통해 상세하게 관찰한다.
6. 미세수술기구를 이용하여 혈관손상을 피하면서 고환조직을 섬세하게 박리하면서 조직상태가 보다 발달되어 정자형성가능성이 높아 보이는 정세관 부위를 선택적으로 채취한다.
7. 채취된 정세관조직을 배양접시에 담아 연구실로 보낸다. (정자처리)
8. 정자가 관찰되지 않는 경우 정자형성가능성이 높아 보이는 정세관 부위를 반복적으로추가채취한다.
9. 채취된 정세관조직을 배양접시에 담아 연구실로 보낸다. (정자처리)
10. 출혈이 있는 경우 고환실질조직의 손상을 최소화 하면서 지혈한다.
11. 고환백막을 봉합한다.
12. 고환초막 및 피하봉합을 한다.
13. 정자가 관찰되지 않는 경우 대측 고환에 대해 같은 방법으로 수술을 진행한다.
14. 고환백막을 봉합한다.
15. 고환초막 및 피하봉합을 한다.
16. 피부봉합을 시행한다. (정자처리)
1. 고환조직을 회수할 배양액을 준비한다.
2. 채취된 고환조직을 배양dish에 담아 신선한 배양액으로 세척한다.
3. 메스로 채취된 고환조직을 잘게 조각내거나 미세겸자를 이용하여 세정관을 조심스럽게 짜내어 추출물을 얻는다.
4. 위상차 현미경(배율x2
00) 하에서 정자유무를 관찰한다.
5. 현미경 하에서 정자의 상태 (정자의 수, 운동성, 형태)를 관찰하고 회수된 정자는 배양액으로 세척 후 배양기에서 40분 내지 1시간 동안 배양하여 정자활성을 유도한다.
6. 고배율 현미경을 통해 체외수정에 필요한 정자를 선별한다.
