1. 난자 채취 4~6시간 후, 시술할 환자와 배우자의 성명을 확인한 후 해당 배우자의 정자가 맞는지 다시 확인한다.
2. 준비된 정자의 농도를 확인하고, 정해진 기준에 맞추어 정자용액을 희석한다.
3. 배양기에서 난자가 들어있는 배양접시를 꺼내어, 해당 환자의 것이 맞는지, 난자의 수가 기록과 일치하는지 확인한다.
4. 해부현미경으로 난자의 성숙 정도를 다시 확인하고, 난자의 성숙도에 따라 수정시간을 달리할 필요가 있는 경우 시술할 배양접시인지 확인한다.
5. 파스퇴르 피펫으로 정자용액을 흡입하고, 정자농도에 따라 1~2방울을 배양접시에 떨어뜨린다.
6. 도립현미경에서 배양접시를 관찰하여 적정한 농도의 정자가 수정(insemination)되었는지 확인한다.
7. 배양접시를 배양기로 옮겨 배양한다.
8. 일반 체외수정 시술을 종료한 시간, 시행한 난자의 수, 난자 상태, 작업자명 등 시행한내용을 기록한다.
9. 정해진 시간 후(수정 실시 16~20시간 후) 배양접시를 해부현미경으로 가져와 작업자가 환자의 이름을 확인한다.
10. 해부현미경으로 배양접시에 있는 난자의 수를 확인하고 기록된 수와 일치하는지 확인한다.
11. 나화용 파스퇴르 피펫으로 배양접시 바닥에 부착된 난자-난구세포 복합체에서 난자부분을 흡입하고, 흡입-배출을 반복하여 난자주변의 방사관 세포까지 완전히 제거한다.
12. 난구세포가 제거된 난자는 배양접시의 한쪽에 둔 후, 다른 난자-난구세포 복합체에서 11번 과정을 반복해 난자를 확보한다. 13 모든 난자의 나화를 종료하면 수정여부를 확인한다.
14. 2개의 극체와 2개의 전핵이 확인되면 정상 수정으로 판정한다. 필요에 따라 고배율의 현미경으로 인(nucleoli)들을 관찰하기도 한다.
15. 정상 수정란들은 새로운 배양접시로 옮겨 배양한다.
16. 전핵이 확인되지 않은 난자는 새로운 배양접시로 옮겨 24시간 동안 추가배양 후 전핵의 형성여부 혹은 난할 시작 등을 확인한다.
17. 최종적으로 미수정된 것으로 확인된 난자는 실험실에서 정해진 방법에 따라 폐기한
다. 비정상 숫자의 전핵이 확인된 수정란도 실험실에서 정해진 방법에 따라 폐기한다. 손상된 수정란도 폐기한다.
