i. 기계적 방법 1. 이식 전 대상 배아를 유리 파이펫을 이용하여 오일이 덮여 있는 pH완충 버퍼 배양액으로 옮긴다. 2. 미세조작기 위에서 배아의 위란강 (perivetilline) 공간이 가장 큰 영역을 12시 시계 방향에 위치하도록 하고 9시 시계 방향에 Holding 피펫으로 고정한다. 3. Injection 피펫은 1시와 2시 시계 방향 사이에서 투명대의 한쪽 면에서 반대쪽 방향으로 관통시킨다. 4. Injection 피펫이 관통된 투명대 단면과 Holding 피펫 단면을 서로 마주보며 평행하게한 후 강제적으로 압축하여 문지른다. 5. 배아 보조부화술이 끝난 배아는 이식 배양액으로 유리파이펫을 이용하여 옮겨 이식전까지 배양한다. ii. 레이저 장치를 이용한 방법 1. 배아를 유리 파이펫을 이용하여 오일이 덮여 있는 배양액으로 옮긴다. 2. 미세조작기 위에 배아가 들어가 있는 배양접시를 올리고 레이저 포인트는배아의 할구 사이에 위란강 공간이 가장 넓은 곳으로 초점을 맞춘다. 3. 레이저의 열은 50-100%으로 세팅하고 약 500μs pulse로 맞춰준다. 4. 배아의 할구에서 가장 먼 투명대 바깥 부분부터 넓은 위란강 공간 방향으로 투명대 개구부를 약 20 um를 초과하지 않도록 제거한다. 5. 배아 보조부화술이 끝난 배아는 이식 배양액으로 유리파이펫을 이용하여 옮겨 이식전까지 배양한다.