1. 수정확인 후 새로운 배양액으로 교체 후 다시 인큐베이터에 넣어 배양한다 (배양액 종류에 따라서 배양액을 교체하지 않고 계속 배양하는 경우도 있다).
2. 수정확인 후 하루를(D
2) 배양기에서 배양한 배아들을 관찰하기 위해 인큐베이터에서배양접시를 꺼내어 해부 현미경하에서 세포의 발달생태 및 세포 분열양상, 모양을 평가한다. 배아 발달 과정상 난할구 분절정도, 특이사항 등을 기록하여 이식과 냉동할 배아를선별하는데 도움이 되도록 한다.
3. 평가한 사항을 의무기록에 기입하고 당일 이식할지 추가 배양할지 여부를 결정한다.
4. 확인한 배양접시는 다시 배양기에 넣는다.
5. 각각의 배양접시의 배아들을 대상으로 각각 1~4의 단계를 시행한다.
6. 필요하다고 판단될 경우 2~4의 과정을 당일에 추가할 수 있다.
7. 48시간 배양한(D
3) 배아들을 관찰하기 위해 인큐베이터에서 배양접시를 꺼내어 해부현미경하에서 평가한다.
8. 평가한 사항을 의무기록에 기입하고 추가 배양 여부를 결정한다.
9. 추가 배양하기로 결정된 경우 새로운 배양액으로 교체한다. 배양액 종류에 따라서 배양액을 교체하지 않고 계속 배양하는 경우도 있다.
10. 확인한 배양접시는 다시 배양기에 넣는다.
11. D3에 관찰한 배아 상태에 따라서 필요하다고 판단되는 경우 하루 더 배양한(D
4) 배아들을 관찰하기 위해 인큐베이터에서 배양접시를 꺼내어 해부 현미경하에서 세포의 발달상태 및 세포분열양상, 모양을 평가하고 배아이식 일자를 결정한다.
12. 새로운 배양액으로 교체한다. 배양액 종류에 따라서 배양액을 교체하지 않고 계속배양하는 경우도 있다.
13. 평가한 사항을 의무기록에 기입하고 추가 배양 여부를 결정한다.
14. 확인한 배양접시는 다시 배양기에 넣는다.
15. 수정확인 후 배양 4일째(D5, 배아 이식 혹은 배아 냉동 날) 인큐베이터에서 배양접시를 꺼내어 해부 현미경하에서 세포의 발달상태 및 세포 분열양상, 모양을 평가하고 이식및 냉동가능 배아를 구분한다.
16. 평가한 사항을 의무기록에 기입하고 추가 배양 여부를 결정한다. 이식이나 냉동하지않으면서 추가 배양하지 않기로 결정한 배아들은 기준에 의하여 폐기 처리한다.
17. 추가 배양하기로 결정된 배아들은 배양기에 넣어 더 배양하고, 배양 5일째 혹은 6일째에 배아상태를 해부 현미경 하에서 관찰한다.
18. 평가한 사항을 의무기록에 기입하고 이식 및 냉동여부를 판단내린다.
